Электрофорез: что это такое, для чего и как это делается

Электрофорез - это лабораторный метод, осуществляемый с целью разделения молекул в соответствии с их размером и электрическим зарядом, чтобы можно было поставить диагноз заболеваний, проверить экспрессию белка или идентифицировать микроорганизмы.

Электрофорез - это простая и недорогая процедура, используемая в лабораторных условиях и в исследовательских проектах. В соответствии с целью электрофореза может потребоваться проведение других тестов и экзаменов, например, для постановки диагноза.

Для чего это

Электрофорез может быть выполнен для нескольких целей, как в исследовательских проектах, так и в диагностике, поскольку это простой и недорогой метод. Таким образом, электрофорез может быть выполнен для:

• Выявление вирусов, грибков, бактерий и паразитов, наиболее распространенным из которых является применение в исследовательских проектах; тест на отцовство; проверка экспрессии белков; выявление мутаций, полезных, например, при диагностике лейкемии; анализ типов циркулирующего гемоглобина, полезно в диагностике серповидно-клеточной анемии; оценить количество белков, присутствующих в крови.

В соответствии с целью электрофореза, может потребоваться проведение других дополнительных тестов для врача для завершения диагностики.

Как это делается

Для проведения электрофореза необходим гель, который может быть из полиакриламида или агарозы в зависимости от цели, буфера для электрофореза и чана, маркера молекулярной массы и флуоресцентного красителя, в дополнение к оборудованию для УФ или светодиодного освещения, также известному как трансиллюминатор.

После приготовления геля необходимо поместить конкретный предмет так, чтобы в геле были сделаны лунки, обычно называемые гребенкой, и дать гелю осесть. Когда гель будет готов, просто нанесите вещества в лунки. Для этого в одну из лунок должен быть помещен маркер молекулярного веса, положительный контроль, которым является вещество, о котором известно, что это такое, отрицательный контроль, который гарантирует достоверность реакции, и анализируемые образцы. Все образцы должны быть смешаны с флуоресцентным красителем, так как таким образом можно визуализировать полосы на трансиллюминаторе.

Гель с образцами должен быть помещен в ванну для электрофореза, которая содержит специфический буферный раствор, и затем устройство включается так, что возникает электрический ток и, следовательно, разность потенциалов, что важно для разделения. частицы в соответствии с их нагрузкой и размером. Время электрофоретического бега варьируется в зависимости от цели процедуры и может длиться до 1 часа.

По истечении определенного времени можно просмотреть результат электрофоретического прогона через трансиллюминатор. Когда гель помещают под ультрафиолетовое или светодиодное излучение, можно визуализировать структуру полос: чем больше молекула, тем меньше ее миграция, чем ближе к лунке, тем светлее молекула, тем больше миграционный потенциал.,

Чтобы реакция была подтверждена, полосы положительного контроля должны быть визуализированы, и ничто не должно быть визуализировано в отрицательном контроле, так как в противном случае это признак того, что произошло загрязнение, и весь процесс должен быть повторен.

Типы электрофореза

Электрофорез можно проводить для разных целей, и, в соответствии с его назначением, можно использовать несколько типов гелей, наиболее распространенными из которых являются полиакриламид и агароза.

Электрофорез для выявления микроорганизмов чаще используется в исследовательских лабораториях, однако для диагностических целей электрофорез можно использовать для выявления гематологических заболеваний и заболеваний, которые развиваются с увеличением количества белков, являясь основными типами электрофореза.:

1. Электрофорез гемоглобина

Электрофорез гемоглобина - это лабораторная методика, выполняемая для выявления различных типов гемоглобина, циркулирующих в крови, позволяющая определить наличие заболеваний, связанных с синтезом гемоглобина. Тип гемоглобина идентифицируется с помощью электрофореза при определенном рН, в идеале от 8, 0 до 9, 0, с проверкой картины полос, которую можно сравнить с нормальной картиной, что позволяет идентифицировать наличие аномальных гемоглобинов.

Для чего это делается: Электрофорез гемоглобина проводится для исследования и диагностики заболеваний, связанных с синтезом гемоглобина, таких как серповидноклеточная анемия и заболевание гемоглобином С, в дополнение к тому, что он полезен для дифференциации талассемии. Узнайте, как интерпретировать электрофорез гемоглобина.

2. Белковый электрофорез

Белковый электрофорез - это обследование, запрошенное врачом для оценки количества белков, циркулирующих в крови, и, таким образом, для выявления заболеваний. Этот тест делается из образца крови, который центрифугируют для получения плазмы, части крови, состоящей, среди прочего, из белков.

После электрофореза можно визуализировать картину полос и, следовательно, график, на котором указано количество каждой фракции белков, что является основополагающим для диагностики.

Для чего: Белковый электрофорез позволяет врачу исследовать возникновение множественной миеломы, дегидратации, цирроза, воспалений, заболеваний печени, панкреатита, волчанки и гипертонии в соответствии с паттерном группы и графиком, представленным в отчете об исследовании., Понять, как это делается и как понять результат электрофореза белка.