Молекулярная диагностика соответствует набору молекулярных методов, которые направлены на выявление изменений в ДНК, которые могут указывать, например, на генетические заболевания или рак. Кроме того, молекулярные методы широко используются для выявления и подтверждения инфекционных заболеваний, поскольку они представляют собой более быстрый и точный метод диагностики.
Молекулярная диагностика стоит дорого, и поэтому врачи не очень часто ее запрашивают, однако она дает точные результаты в отношении наличия изменений, того, как они могут влиять на функционирование организма и реакцию пациента на лечение.
Для чего это
Молекулярная диагностика может быть выполнена с несколькими целями, основными из которых являются:
- Идентификация мутаций, связанных с лейкемией, таких как идентификация транслокации BCR-ABL, которая характерна для хронического миелоидного лейкоза (CML); Характерные мутации гематологических заболеваний, таких как наследственный гемохроматоз, полицитемия вера, эссенциальная тромбоцитемия и тромбофилия, например Молекулярные изменения, которые указывают на возникновение рака, такого как колоректальный рак, рак легкого, рак молочной железы и мозга, например: диагностика инфекционных заболеваний, таких как гепатит, уретрит, токсоплазмоз, лейшманиоз и т. Д., В дополнение к идентификации вируса HPV.
Молекулярная диагностика, несмотря на то, что ее считают дорогостоящей по сравнению с другими методами диагностики, является более точной, поскольку она способна информировать об изменениях, связанных с определенным заболеванием, и степень влияния этих изменений в организме, тем самым помогая лечению человека.
В дополнение к тому, что они используются для диагностики различных заболеваний, молекулярные методы также используются для оценки реакции на лечение, особенно у онкологических больных, и являются одним из наиболее эффективных методов для выявления прогрессирования и рецидива заболевания.
Как это делается
Молекулярная диагностика может быть выполнена с любым образцом, по запросу врача, который может наилучшим образом предоставить информацию о состоянии пациента, например моча, слюна или, в большинстве случаев, кровь. Нет необходимости в посте или какой-либо другой подготовке к экзамену.
Образец собирается и отправляется в лабораторию вместе с указаниями врача, информирующими об обследовании или типе исследования, которое необходимо провести. Молекулярная техника зависит от требуемого обследования и включает серию точных процедур, направленных на выявление наличия или отсутствия изменений, запрошенных врачом.
Обычно используется только небольшое количество отправленной пробы, остальная часть хранится, чтобы при необходимости повторный анализ.
Посмотрите, каковы основные молекулярные методы
ПЦР
ПЦР, сокращение от «полимеразная цепная реакция» или « полимеразная цепная реакция» , представляет собой молекулярный метод, который заключается в амплификации фрагмента генетического материала, ДНК или РНК, с целью выявления мутаций и, таким образом, помощи в диагностике заболеваний.,
Этот метод основан на извлечении и очистке генетического материала, который затем помещается в смесь, в которой один из компонентов представляет собой фермент рестрикции, который варьируется в зависимости от запрошенного исследования и выполняет функцию разрезания материала на фрагменты. так что возможное генетическое изменение может быть идентифицировано. Смесь помещается в термоциклер, который представляет собой устройство, которое воздействует на изменение температуры, указанное профессионалом в соответствии с экзаменом, и, таким образом, позволяет амплифицировать генетический фрагмент. В случае обычной ПЦР после амплификации продукт ПЦР подвергают электрофорезу, который представляет собой молекулярный метод, основанный на массе и размере фрагментов, то есть в соответствии с этими характеристиками создается полосовая структура, анализ которой проводится на основе полосы положительного контроля, то есть полосы, которая, как известно, соответствует генетическому изменению.
ПЦР в реальном времени, также называемая КПЦР, представляет собой тип количественной ПЦР, то есть, помимо идентификации генетических изменений, она может предоставить информацию о экспрессии генов, то есть о том, насколько измененный ген экспрессируется в организме. таким образом, его можно использовать для диагностики и контроля лечения. ПЦР в реальном времени не требует электрофореза, весь процесс амплификации и анализа генетического материала выполняется устройством, а результат интерпретируется квалифицированным медицинским работником.
секвенирование
Секвенирование - это молекулярный метод, который заключается в определении последовательности нуклеотидов ДНК, которые являются образующими единицами генетического материала. Секвенирование происходит по реакции, аналогичной ПЦР, однако в смеси для амплификации модифицированные нуклеотиды добавляются путем добавления флуорохромов, которые по мере амплификации материала модифицированные нуклеотиды включаются в ДНК и генерируют несколько фрагментов, которые соответствуют продукту секвенирования.
Продукт реакции помещают в устройство, называемое секвенатором ДНК, в котором, когда фрагменты достигаются лазером оборудования, флуорохромы возбуждаются, испуская флуоресценцию, которая указывается оборудованием с помощью пиков, причем каждый пик соответствует в нуклеотид. В конце реакции оборудование сообщит последовательность ДНК, что позволит врачу диагностировать генетические заболевания.
